Die ursprüngliche Brauerei wurde 1869 unter dem Namen Erste Pilsener Aktienbrauerei gegründet. Diese verwendete zuerst nur für ihr Bier, später auch als Brauereinamen, die Marke Plzeňský Gambrinus (deutsch: Pilsner Gambrinus).
Nach dem Zweiten Weltkrieg wurde die Brauerei mit dem älteren Bürgerlichen Brauhaus (Biermarke Pilsner Urquell) unter dem Namen Pilsener Brauereien zusammengeschlossen und verstaatlicht. Im Jahr 1972 überschritt die jährliche Produktion die Marke von 1 Mio. hl.[1] 1992–1994 wurde das Staatsunternehmen privatisiert und erhielt den Namen Plzeňský Prazdroj a.s. (deutsch: Pilsner Urquell AG). Mit der Privatisierung erfolgten umfangreiche Modernisierungsmaßnahmen. 1993 wurde die Hauptgärung von offenen Bottichen auf geschlossene zylindrokonische Tanks umgestellt,[2] 1998 wurde ein neues Sudhaus in Betrieb genommen. Die Jahresproduktion der Marke Gambrinus wurde auf 3,5 Mio. hl gesteigert.[3] Seit 2016 gehört das Unternehmen zum Asahi-Konzern.
Der Name stammt von Gambrinus, der Überlieferungen nach als Erfinder des Bierbrauens gilt.
Die Brauerei war von der Saison 1997/98 bis 2013/14 Namensgeber und Sponsor der höchsten tschechischen Fußballliga.