Jamie est né le à Toronto. En 1999, à l'âge de 10 ans, il commence une carrière de mannequin tout comme son frère aîné. Ils ont tous les deux posés pour des catalogues ou des campagnes publicitaires et sont également apparus dans quelques spots pour la télévision. Après plusieurs petits rôles, Jamie est choisi pour interpréter Adam Frake dans la série Zixx : Level One. Il a ensuite joué dans trois téléfilms diffusés en prime sur la chaîne Lifetime. Il continue en décrochant le rôle de Cliff Woodall dans la série Méthode Zoé. Après l'arrêt de la série, Jamie rejoint le casting de la série Degrassi : La Nouvelle Génération, série dans laquelle il incarne depuis 2005 Peter Stone.
Jamie Johnston a été nommé au Young Artist Award de Los Angeles pour son interprétation dans Avec les Yeux du Cœur et pour son rôle dans la série Méthode Zoé. Depuis 2005, il est nommé chaque année pour son rôle dans la série Degrassi : La Nouvelle Génération ce qui lui a permis de remporter deux récompenses (dont le prix du meilleur premier rôle dans une série).