Tetanolisin adalah racun yang dihasilkan oleh bakteri Clostridium tetani. Dampak racun ini tidak diketahui secara pasti, tetapi diduga racun ini memperkuat patogenesis tetanus. Racun C. tetani lainnya, yaitu tetanospasmin, memiliki korelasi yang jauh lebih kuat dengan penyakit tetanus.
Tetanolisin tergolong ke dalam kelompok racun protein yang disebut sitolisin yang mengikat pada kolesterol. Sitolisin membentuk pori-pori di dalam membran sitoplasmik yang memungkinkan masuknya ion dan molekul lain ke dalam sel.
Massa molekular tetanolisin diperkirakan mencapai 55.000 dalton.