에오신 메틸렌 블루(영어: Eosin methylene blue, EMB)는 그람 음성균에 대한 선택적 염색약이다.[1] EMB에는 그람 양성균에 유독한 염료가 포함되어 있다. EMB는 대장균군에 대한 선택 배지이다. 에오신과 메틸렌블루가 6:1의 비율로 혼합되어 있다. EMB는 감별 미생물 배지로서 그람 양성균의 성장을 억제한다. 대장균과 같이 유당을 발효시키는 유기체와 살모넬라와 같이 그렇지 않은 유기체를 구별하도록 돕는다.[2] 유당을 발효시키는 유기체는 중심부가 어두운 핵이 있는 콜로니가 나타난다.[3]
EMB는 단기간에 병원성 미생물을 구별해 의학실험실에서 중요하다.[4] 빠른 유당 발효는 산을 생성하며, 이는 pH를 낮춘다. 이것은 보라색과 검은색으로 염색된 콜로니에 의한 염료 흡수를 촉진한다. 유당 비발효제는 단백질의 탈아미노화에 의해 pH를 증가시킬 수 있다. 이렇게 하면 염료가 흡수되지 않는다. 이때, 콜로니는 무색이다.
EMB에서 E. coli가 성장하면 독특한 금속성 녹색 광택이 나타난다. 이는 염료의 변색 특성, 편모를 사용한 E. coli의 이동 및 발효의 강산성 최종 산물로 인해 나타난다. 시트로박터와 엔테로박터의 일부 종은 EMB에도 이런 방식으로 반응한다.[5][6]
EMB는 펩톤, 유당, 인산 이칼륨, 에오신 Y, 메틸렌 블루 및 한천 성분을 포함한다. 유당을 포함하지 않는 EMB 한천도 있다.