Dưới đây là danh sách các thành viên chủ chốt và thông thường của Shinsengumi, bao gồm cả thời trước khi sử dụng cái tên này.
Matsumoto Jun là bác sĩ kiêm trưởng nhóm ở bệnh xá tây dương Mạc Phủ, được Kondō Isami mời khám bệnh cho các thành viên trong Shinsengumi, làm việc tại trạm quân y trong chiến tranh Mậu Thìn. Ngoài ra Matsumoto Jun còn chuyên chăn nuôi lợn, trong việc chăn nuôi lợn (nuôi lợn bằng gạo dư thừa) ông còn mang theo lợn con từ Kobe trong thời gian đồn trú ở chùa Nishimotoganji, để làm thịt lợn cung cấp cho các thành viên dùng bữa. Sau đó giải nghệ và truyền thụ lại cho đệ tử Minamibu Seiichi ở Kiyacho.